ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ПСИХРОТРОФНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ-НЕФТЕДЕСТРУКТОРОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ПОЧВ ЗАПАДНОГО КАЗАХСТАНА Шарипова Г.Ж.,Хасенова Э.Ж.,Махатова А.С.,Молдагулова Н.Б.

РГП «Национальный центр биотехнологии», г. Астана


Номер: 7-1
Год: 2014
Страницы: 28-31
Журнал: Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук

Ключевые слова

углеводородокисляющие психротрофные микроорганизмы, культурально-морфологические свойства, биохимические свойства, hydrocarbon-oxidizing psychrophilic microorganisms, cultural-morphological properties, biochemical рroperties

Просмотр статьи

⛔️ (обновите страницу, если статья не отобразилась)

Аннотация к статье

В статье приводятся результаты по изучению культурально-морфологических, физиолого-биохимических (сахаролитические, протеолитические, ферментативные) свойств психроактивных штаммов, выделенных из нефтезагрязненной почвы Западного Казахстана.

Текст научной статьи

Введение Микробиологические методы являются неотъемлемым компонентом современной биотехнологии для очистки окружающей среды от нефти и нефтепродуктов. Основную роль в биологической ремедиации нефтезагрязненных почв играет количество и активность нефтеокисляющих микроорганизмов. Поиск и изучение свойств психротрофных бактерий, проявляющих высокую нефтедеструктивную активность является весьма актуальной задачей [1,2]. Применение биопрепаратов-нефтедеструкторов на основе психротрофных нефтеокисляющих микроорганизмов в сочетании с традиционными методами позволит проводить биоремедиационные работы круглый год. Сократиться время на очистку единицы площади от нефтезагрязнении. Соответственно сократятся финансовые и материальные расходы на проведение самих биоремедиационных работ в пересчете на единицу очищаемой площади [3]. Цель настоящей работы - изучение свойств психротрофных микроорганизмов-деструкторов, выделенных из почв Западного Казахстана. Материалы и методы. Выделение психротрофных углеводородокисляющих культур микроорганизмов проводили из нефтезагрязненной почвы методом накопительных культур и путем высева почвенной суспензии на агаризованную среду Ворошиловой-Диановой, в которую добавляли в качестве единственного источника углерода и энергии - 1% сырую нефть [4,5]. Проверку чистоты культур определяли методом микроскопии. Выделенные бактерии из почвы идентифицировали на основе изучения культуральных, морфологических, физиолого-биохимических свойств в соответствии с определителем Берджи (1997) [6], также идентификацию проводили на бактериологическом анализаторе VITEK Compact. Для выявления протеолиза казеина использовали молочный агар. Величина зоны просветления молочного агара вокруг выросших по штриху колоний бактерий свидетельствовала об интенсивности протеолиза казеина. Гидролиз крахмала обнаруживали после обработки агаровой пластинки раствором Люголя [7,8]. Ферментативные активности изолятов проводили с использованием готовых микротестов: каталазный - оксидазный тесты фирмы «Becton, Dickinson and Company USA», микротесты для определения индола, нитрата, фенилаланина, полоски для определения сероводорода (Hi-Media) [9]. Результаты исследований. С целью выделения активных штаммов углеводородокисляющих психротрофных микроорганизмов нами были отобраны 105 культур из нефтезагрязненных почв и нефтешламов Западного региона Казахстана. В процессе скрининга наибольшей нефтеокисляющей активностью обладали только 7 штаммов. Для определения нефтеокисляющей активности, отобранные культуры культивировали на среде ВД с содержанием 3 % сырой нефти при температуре +10 0С. Результаты гравиметрического анализа деструкции нефти представлены в таблице 1. Таблица 1 Нефтеокисляющая активность выделенных изолятов Наименование штамма ДН-1 А1 КЛ1 КЛ4 ЖН-1 S20 15/6 Деструкция нефти, % 99 50 76 77 86 53 78 Данные из таблицы свидетельствуют о том, что все 7 штаммов обладают нефтеокисляющей активностью. Далее были изучены культурально-морфологические, биохимичекие свойства отобранных культур микроорганизмов. Таблица 2 Культурально-морфологические свойства активных штаммов углеводородокисляющих микроорганизмов При изучении культуральных свойств активные углеводородокисляющие микроорганизмы были представлены в виде: колонии круглые, гладкие с блестящей поверхностью бежевого, розового и молочного цвета с ровными краями. Преобладают культуры с выпуклым профилем колонии. Размер колоний в среднем составляет 1-5 мм. По отношению к кислороду культуры относятся к аэробам и факультативными анаэробами. Микроморфологические свойства выделенных изолятов представлены граммположительными палочками, кокками, коккоподобными клетками различных размеров. Изучение биохимических свойств микроорганизмов показало, что все культуры каталазаположительные, КЛ4, А-1 и S20 - оксидазаположительные. Амилолитической активностью обладало подавляющее большинство культур, среди них наиболее активными являются ДН-1, ЖН-1, 15/6, S20. Размеры зоны гидролиза колебались в пределах 15-35 мм. Казеинолитическую активность проявили штаммы ЖН-1, S-20 (от 15-24 мм). Полное разжижение желатины было отмечено у штаммов ДН-1, ЖН-1, КЛ-1. Все изученные культуры микроорганизмов не образовывали индол, сероводород продуцировали только КЛ4 и 15/6, нитриты восстанавливали до нитратов. Все культуры росли на среде Эшби кроме культуры КЛ1. Таблица 3 Биохимический анализ штаммов Также изучали способность выделенных микроорганизмов сбраживать следующие виды углеводов: лактозу, глюкозу, целлобиозу, тригалозу, раффинозу, галактозу, рамнозу, маннит, фруктозу, арабинозу, ксилозу, мальтозу, маннозу, мелибиозу, салицин, сахарозу. Результаты расщепления углеводов представлены в таблице 2. Таблица 4 Способность микроорганизмов ассимилировать углеводы Подпись: Штаммы Углеводы КЛ4 15/6 А1 ДН-1 S20 КЛ1 ЖН-1 рафиноза + + + + + + + рамноза + + + + + + + инулин + + + + + + + мелибиоза + + + + + + + сахароза + + + + + + + лактоза + + + + + + + трегалоза + ± - + + + + сорбитол + + + + + + + инозит + + + + + + + арабиноза + + + + + + + галактоза + + + + + + + целлобиноза + + ± ± + + + ксилоза + + + + + + + манноза + + + + + + + маннит + ± + + + + + дульцит + + + + + + + салицин - + + + + + - фруктоза + + - - + + + мальтоза - ± - + + + - глюкоза + - - + - + + Примечания 1. «+» - признак выражен 2. «-» - признак отсутствуют 3. «±» - слабовыраженная положительная реакция. Заключение В результате проведенных исследований из нефтезагрязненных почв Западного Казахстана было отобрано 30 почвенных образцов, выделено 105 культур микроорганизмов. По способности к нефтеокислению было отобрано 7 психротрофных культур микроорганизмов. На основании фенотипической идентификации определена родовая принадлежность активных штаммов микроорганизмов. Основными представителями углеводородокисляющих микроорганизмов Западного Казахстана являются микроорганизмы рода Rhodococcus.

Научные конференции

 

(c) Архив публикаций научного журнала. Полное или частичное копирование материалов сайта возможно только с письменного разрешения администрации, а также с указанием прямой активной ссылки на источник.